返回 
加入收藏
苯甲酰乌头原碱对人肺癌A549细胞自噬和凋亡的影响
x
请在关注微信后，向客服人员索取文件
| 篇名： | 苯甲酰乌头原碱对人肺癌A549细胞自噬和凋亡的影响 |
| TITLE： | |
| 摘要： | 目的：研究苯甲酰乌头原碱（BAC）对人肺癌A549细胞自噬和凋亡的影响，探讨其用于非小细胞肺癌治疗的作用机制。方法：采用不同剂量的BAC（10、50、100、200、400 μmol/L）分别对A549细胞进行处理后，观察细胞的形态变化，并采用CCK-8法测定细胞的增殖抑制率。将细胞分为对照组（不加药物）和BAC低、高剂量组（200、400 μmol/L），分别加入相应药物处理后，采用流式细胞术测定细胞凋亡率，采用聚合酶链式反应法和Western blotting测定细胞中凋亡相关因子B淋巴细胞瘤因子2（Bcl-2）、Bcl-2凋亡相关X蛋白（Bax）、胱天蛋白酶3（Caspase-3）和自噬相关因子Beclin1、LC3、P62的基因及蛋白表达水平。结果：采用不同剂量的BAC处理后，细胞出现皱缩、排列稀疏、溶解等现象，BAC 100、200、400 μmol/L剂量组细胞增殖抑制率显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。流式细胞术检测结果显示，BAC低、高剂量组细胞凋亡率分别在药物作用24、48 h时有不同程度的上升，且该促凋亡作用具有剂量、时间依赖趋势。与对照组比较，BAC各剂量组细胞中Bcl-2、P62的mRNA和蛋白表达水平均有不同程度的降低，Bax、Caspase-3、Beclin1、LC3的mRNA和Bax、Active Caspase-3、P62、Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表达水平均有不同程度的升高，其中BAC低剂量组Caspase-3的mRNA和Bcl-2、Active Caspase-3、Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白表达水平，以及BAC高剂量组各目标基因的mRNA和蛋白的表达水平差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01），且上述影响均呈剂量依赖趋势。结论：BAC可抑制A549细胞的增殖、促进其凋亡，并且能促进Beclin1、LC3（LC3Ⅱ/Ⅰ）、Bax、Caspase-3（Active Caspase-3）表达和抑制P62、Bcl-2等自噬/凋亡相关基因及蛋白的表达；其机制可能与BAC通过促进细胞发生过度自噬从而导致细胞凋亡有关。 |
| ABSTRACT： | OBJECTIVE： To study the effects of benzoyl aconitine （BAC） on autophagy and apoptosis of human lung cancer A549 cells， and to investigate its mechanism in anti-non-small cell lung cancer. METHODS： A549 cells were treated with different doses of BAC （10， 50， 100， 200， 400 μmol/L）， and then cell morphology was obtained； the proliferation inhibition rate of the cell was determined by CCK-8 assay. The cells were divided into control group （without drug）， BAC low-dose and high-dose groups （200， 400 μmol/L）. After treated with relevant drugs， the apoptosis rate of cells was determined by flow cytometry. The gene and protein expression of apoptosis-related factors Bcl-2， Bax， Caspase-3 as well as autophagy-related factors Beclin1， LC3， P62 were determined by RT-PCR and Western blotting assay. RESULTS： After treated with different doses of BAC， the cells were shrunken and sparsely arranged； inhibitory rate of cell proliferation was increased significantly in BAC 100， 200， 400 μmol/L groups （P＜0.05 or P＜0.01）. Results of flow cytometry showed that the apoptotic rates of cells were increased to different extents in BAC low-dose and high-dose groups after treated for 24 and 48 h， in a concentration and time-dependent manner. Compared with control group， mRNA and protein expression of Bcl-2 and P62 were decreased to different extents in BAC groups； mRNA expression of Bax， Caspase-3， Beclin1 and LC3 as well as protein expression of Bax， Active caspase-3， P62， Beclin1， LC3Ⅱ/Ⅰ were increased to different extent； there was statistical significance in mRNA expression of Caspase-3， and protein expression of Bcl-2， Active Caspase-3， Beclin1， LC3Ⅱ/Ⅰ and P62 in BAC low-dose group as well as all target mRNA and protein expression in BAC high-dose group （P＜0.05 or P＜0.01）， in dose-dependent manner. CONCLUSIONS： BAC can inhibit the proliferation and promote the apoptosis of A549 cells， promote Beclin1， LC3（LC3Ⅱ/Ⅰ），Bax and Caspase-3 （Active Caspase-3） gene and their protein expression， but inhibit P62 and Bcl-2 gene and their protein expression. The mechanism may be related to BAC inducing apoptosis by promoting excessive autophagy of cells. |
| 期刊： | 2019年第30卷第20期 |
| 作者： | 邵鑫，韩彬，蒋先虹，黎风，何梅，刘福 |
| AUTHORS： | SHAO Xin，HAN Bin，JIANG Xianhong，LI Feng，HE Mei，LIU Fu |
| 关键字： | 苯甲酰乌头原碱；非小细胞肺癌；A549细胞；增殖；自噬；凋亡 |
| KEYWORDS： | Benzoyl aconitine； Non-small cell lung cancer； A549 cells； Proliferation； Autophagy； Apoptosis |
| 阅读数： | 359 次 |
| 本月下载数： | 14 次 |
* 注：未经本站明确许可，任何网站不得非法盗链资源下载连接及抄袭本站原创内容资源!在此感谢您的支持与合作！
