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柱后衍生阳离子交换色谱法同时测定新疆产贝母中17种氨基酸的含量
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| 篇名： | 柱后衍生阳离子交换色谱法同时测定新疆产贝母中17种氨基酸的含量 |
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| 摘要： | 目的：建立同时测定新疆产贝母中17种氨基酸含量的方法。方法：采用阳离子交换色谱柱分离17种氨基酸；采用柱后衍生阳离子交换色谱法测定药材中17种氨基酸的含量：色谱柱为LCAK 06/Na柱，流动相A为柠檬酸三钠11.9 g、柠檬酸6 g、苯酚1 g，加水溶解，再加65 mL甲醇和6 mL浓盐酸，加水定容（调pH至3.4），流动相 B为柠檬酸三钠11.9 g、氢氧化钠2.8 g、苯酚1 g、硼酸5.0 g，加水溶解并定容（调pH至10.8）（梯度洗脱），流速为0.45 mL/min（A泵）、0.25 mL/min （M泵），检测波长为440 nm（脯氨酸）、570 nm（其余氨基酸），进样量为50 μL。结果：天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸和脯氨酸检测浓度线性范围均为20～400 nmol/mL（除胱氨酸10～200 nmol/mL）（r均大于0.989 0）；精密度、重复性、稳定性试验的RSD＜2.0％；检测限除胱氨酸外（0.08 nmol/mL）其余氨基酸均为0.16 nmol/mL；加样回收率为98.5％～99.5％（RSD为0.06％～0.21％，n＝6）。结论：该方法操作简便，精密度、稳定性、重复性好，可用于新疆产贝母中氨基酸含量的同时测定。 |
| ABSTRACT： | OBJECTIVE： To establish a method of contents determination of 17 amino acids in Fritillariae Pallidiflorae Bulbus produced in Xinjiang. METHODS： Cation-exchange column was used to separate 17 kinds of amino acids； post-column derivatization liquid chromatography was used to determine the contents of amino acids： the column was strong sulfonic acid cation exchange resin LCAK06/Na with mobile phase A （weighing trisodium citrate 11.9 g， citric acid 6 g， phenol 1 g， dissolving by water， then adding 65 mL of methanol and 6 mL of concentrated hydrochloric acid， bringing the volume with tap water， adjusting pH to 3.4）， mobile phase B （weighing trisodium citrate 11.9 g， NaOH 2.8 g， phenol 1 g， boric acid 5.0 g， adding water to dissolve， adjusting pH to 10.8）， gradient elution，flow rate was 0.45 mL/min for A pump and 0.25 mL/min for M pump，the detection wavelength was 440 nm for proline and 570 nm for the remaining amino acids，the injection volume was 50 μL. RESULTS： The linear range were 20～400 nmol/mL of aspartic acid，threonine， serine， glutamic acid， glycine， alanine， valine， methionine， isoleucine， leucine， tyrosine， phenylalanine， histidine， lysine， arginine， proline，10-200 nmol/mL of cystine（r were higher than 0.989 0）； RSDs of precision， stability and reproducibility tests were lower than 2.0％； limits of detection were 0.16 nmol/mL except for cystine（0.08 nmol/mL）； recovery was 98.5％-99.5％（RSD was 0.06％-0.21％，n＝6）. CONCLUSIONS： The method is simple with good precision， stability and reproducibility， and can be used for the simultaneous determination of amino acids in Fritillariae Pallidiflorae Bulbus produced in Xinjiang. |
| 期刊： | 2017年第28卷第12期 |
| 作者： | 艾则孜·莫合买提，沙丽娜，阿布力米提·伊力 |
| AUTHORS： | Aziz·MOHAMMAT，SHA Lina，Ablumiti·YILI |
| 关键字： | 贝母；氨基酸；柱后衍生化；阳离子交换色谱法 |
| KEYWORDS： | Fritillariae Pallidiflorae Bulbus； Amino acids； Post-column derivatization； Cation exchange chromatography |
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